高效液相色谱仪色谱柱长期使用后柱效会下降（色谱柱的理论塔板数减小），可对色谱柱进行再生。

一、建议用来冲洗色谱柱的溶剂体积：

1、Ф4×125mm色谱柱：

柱体积为1.6mL，所用溶剂体积为30mL。

2、Ф4×250mm色谱柱：

柱体积为3.2mL，所用溶剂体积为60mL。

3、Ф10×250mm色谱柱：

柱体积为20mL，所用溶剂体积为400mL。

二、再生方法：

1、极性固定相的再生：

正庚烷，乙酸乙酯，丙酮，乙醇，水。

2、非极性固定相的再生：

水，乙腈，异丙醇，乙腈，水。

三、注意事项：

1、在对用NH₂改性的色谱柱进行再生时，由于NH₂可能以铵根离子形式存在，因此应在水洗后用0.1M的氨水冲洗，然后用水冲洗至碱溶液完整流出。

2、如果用有机溶剂－水不能完整洗去硅胶表面吸附的杂质，在水洗后加用0.05M的稀硫酸冲洗非常有效。