高效液相色谱仪分析中,柱效是色谱柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱,要追求较优柱效,较好使用较优流速。
一、较优流速的选择:
1、内径4mm色谱柱,流速一般为0.8mL/min。
2、内径4.6mm色谱柱,流速一般为1mL/min。
3、内径10mm制备柱,流速一般为3mL/min。
当选用较优流速时,分析时间可能会延长,可采用改变流动相洗脱强度的方法以缩短分析时间。如使用反相柱时,可适当增加甲醇或乙腈的含量。
二、流动相使用注意事项:
使用合适的流动相可延长色谱柱的使用寿命,提高柱性能。
1、含水流动相较好在实验前配制,尤其是夏天使用缓冲溶液作为流动相时放置不要超过12h。较好加入叠氮化钠,防止细菌生长。
2、流动相要使用0.45μm滤膜过滤,除去微粒杂质。
3、使用HPLC级溶剂配制流动相。