高效液相色谱仪色谱柱柱压升高的可能原因有色谱柱筛板堵塞、非特异性吸附、样品沉淀、盐晶体析出和更换流动相时置换不有效等。

一、色谱柱筛板堵塞：

色谱柱筛板堵塞往往是由于流动相没有过滤或虽已过滤但滤膜孔径过大或滤片损坏，使固体杂质滞留在筛板上造成的。可采用反冲的方法除去堵塞物。

类似的堵塞也会发生在排气阀过滤芯、在线过滤器和保护柱中。建议更换滤芯、在线过滤器筛板和保护柱柱芯。

二、非特异性吸附：

当部分组分在色谱柱上有较强的非特异性吸附，且当前所用流动相难以将它们洗脱时，强保留组分的累积会造成阻力增大，压力升高。可使用适当的溶剂冲洗以除去吸附物。

三、样品沉淀：

当样品所用溶剂与流动相不一致时，样品进入柱中时有可能因溶解度降低而沉淀出来，造成压力升高。建议使用对样品有较高溶解度的溶剂冲洗。

四、盐晶体析出：

使用较高浓度的缓冲液或添加有缓冲液的流动相后，如果冲洗不有效，缓冲液中的无机盐可能会残留在体系中，它们会因在新流动相体系中溶解度降低而析出，造成流动相阻力增大，压力升高。

五、更换流动相时置换不有效：

当更换流动相时，不有效的更换使不同性质和互不相溶的流动相存在一个体系中，会造成压力升高。可使用混溶的溶剂（异丙醇）有效冲洗。