等电聚焦电泳色谱仪是利用蛋白质分子或其它两性分子的等电点不同，在一个稳定的、连续的和线性的pH梯度中进行分离，具有灵敏度高、分辨率高和重复性好等特点，特别适合大批量纯度检测和真实性鉴定以及遗传多样性等群体生物学领域的研究。pH梯度按形成方式可分为载体两性电解质pH梯度和固相pH梯度等。

一、载体两性电解质pH梯度：

载体两性电解质pH梯度的介质是两性分子，在电场中迁移到自己的等电点后自然形成pH梯度。

二、固相pH梯度：

固相pH梯度等利用一系列具有弱酸或弱碱性质的丙烯酰胺衍生物滴定时，在滴定终点附近形成pH梯度并参与丙烯酰胺的共价聚合，形成固定的、不随环境电场条件变化的pH梯度，分辨率可达0.001pH。

三、载体两性电解质与固相pH梯度混合技术：

即在固相pH梯度凝胶中加入载体两性电解质作为添加剂，被称为杂交等电聚焦。

载体两性电解质pH梯度与固相pH梯度的区别在于，前者是两性分子，在电场中两性分子迁移到自己的等电点而形成pH梯度；后者不是两性分子，在凝胶聚合时便形成pH梯度。