高效液相色谱仪键合固定相是采用化学反应将固定液键合在硅胶载体表面上所形成的填料，具有使用过程中不流失、化学性能稳定和热稳定性好等特点。
一、制备硅胶基质键合固定相的注意点：
1、键合反应前，将硅胶表面的硅氧烷全部水解为硅烷醇。
2、除去硅胶表面的吸附水，使表面完整呈自由硅醇基。
二、形成键合固定相应具备的条件：
1、所用基质材料应有某种化学反应活性。
2、有能与基质表面发生化学反应的官能团。
三、双重分离机制：
由键合基团的覆盖率决定。
1、高覆盖率：以分配为主。
2、低覆盖率：以吸附为主。
四、键合固定相制备：
1、合成硅胶基质。
2、键合配体（键合相）。
3、端基封口。
五、键合固定相类型：
1、非极性键合固定相：
常用ODS键合固定相，既有分配作用又有吸附作用。
用途非常广泛，适于分离非极性和弱极性化合物。
2、中等极性键合固定相：
常用醚基键合固定相，可用于正相和反相色谱。
3、极性键合固定相：
常用氨基和氰基键合固定相，用于正相色谱。
氨基键合固定相是分离糖类较常用的固定相。
六、键合固定相特点：
1、传质快：表面无深凹陷。
2、寿命长：化学键合，耐流动相冲击，稳定。
3、选择性好：可键合不同官能团，提高选择性。
4、有利于梯度洗脱。
