反相键合相液相色谱仪流动相溶剂极性越低,洗脱能力越强。
一、常用流动相:
1、甲醇-水。
2、乙腈-水。
3、四氢呋喃-水。
溶剂强度为水<甲醇<乙腈<四氢呋喃。
系统2较系统1好,原因如下:
系统2的粘度较系统1小,柱效好。粘度降低,柱压降低,传质阻力降低(溶质扩散阻力降低),柱效升高。
乙腈的紫外末端吸收较甲醇小,在低波长处测定时,基线波动较甲醇小,测定误差小。
二、流动相的选择:
1、二元溶剂系统:
一般以洗脱能力较弱的水作为底剂,再加入一定量的可与水互溶的有机极性调节剂。常用的专业极性调节剂为甲醇和乙腈。
2、多元溶剂系统:
在二元溶剂系统中加入少量的四氢呋喃,常能改善某些难分离的物质对的分离度。
用水、甲醇、乙腈和四氢呋喃组成三元或四元溶剂系统,并进行优化,选出优质溶剂系统。
三、溶质保留值随溶剂极性变化的一般规律:
有机溶剂比例减小:
1、溶剂的极性增加,洗脱能力降低,溶质的保留时间增加。
2、不同溶质组分间的分离度增加。
3、溶质的柱效降低。