高效毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用带电粒子之间的电泳淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继高效液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平。
一、电泳:
电泳是指带电粒子在电场的作用下,向着与其电性相反的电极方向移动的现象。
二、电泳技术:
电泳技术是指利用电泳现象对混合物进行分离分析的技术。
三、电泳速度vep:
电泳速度vep是指带电粒子在单位电场强度下泳动的速度。
带电粒子在电场中迁移时,所受的电场力为FE:
FE = qE
式中:q为带电粒子的有效电荷,E为电场强度。
带电粒子在溶液中运动时受到的阻力即摩擦力Ff:
Ff = fvep
式中:f为摩擦系数,其大小与带电粒子的大小、形状和电泳介质粘度有关。
对于球形粒子:f = 6πηr
对于棒状粒子:f = 4πηr
式中:η为电泳介质粘度,r为粒子的动力学半径。
平衡时,电场力和摩擦力相等,即:
qE = fvep
对于球形粒子:vep =(qE)/f =(qE)/(6πηr)
对于棒状粒子:vep =(qE)/f =(qE)/(4πηr)
在同一电场中,粒子的电荷性质不同,泳动方向不同;粒子的带电量不同,泳动速度不同;粒子的分子量不同,泳动速度不同;粒子的形状不同,泳动速度不同。因此,不同的粒子可相互分离。
四、电泳淌度μep:
带电粒子在电场中移动的快慢用电泳淌度来表示,一般不用电泳速度表示。
电泳淌度是指带电粒子在给定的溶液中,在单位电场强度下的电泳速度,又称电泳迁移率或泳动度。用μep表示。
对于球形粒子:μep = vep/E = q/(6πηr)
对于棒状粒子:μep = vep/E = q/(4πηr)
带电粒子的电泳速度等于粒子的电泳淌度和电场强度的乘积,即:
vep =μepE
因此,电泳淌度不同是电泳分离的内因和前提。
电泳淌度有绝对电泳淌度、有效电泳淌度和表观电泳淌度。
1、绝对电泳淌度µab:
绝对电泳淌度是指在溶液无限稀释时,带电粒子在单位电场强度下的平均电泳速度。它是该带电粒子在一定溶液中的一个特征物理常数。
2、有效电泳淌度µef:
CE不可能在无限稀释而又没有其它带电粒子和酸度等条件下进行电泳,有效电泳淌度是带电粒子的实际电泳淌度。
3、表观电泳淌度μap:
在有电渗存在下,带电粒子的实际电泳淌度称为表观电泳淌度或净淌度,是有效电泳淌度µef和电渗淌度µeo的矢量和。