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高效凝胶色谱仪分析技术
2016-11-09 14:40:18　来源: 中国振动机械网

 

 
高效凝胶色谱仪分析中不具有分配、吸附和离子交换作用，是基于样品分子尺寸和形状不同实现分离的。
一、工作原理：
小分子可以扩散到凝胶空隙中通过，出峰较慢。
中等分子只能通过部分凝胶空隙，中速通过。
大分子被排斥在外，出峰较快。
二、固定相：
1、半刚性凝胶：
为高交联度的聚苯乙烯，孔径范围较宽。
常以有机溶剂作流动相。
2、刚性凝胶：
为多孔硅胶。
可用水溶性溶剂和有机溶剂作流动相。
可在较高压强和较高流速下操作，但易拖尾。
三、流动相：
常用流动相有甲苯、苯、CH2Cl2、CHCl3、CCl4、四氢呋喃和水溶液等。
1、能溶解样品。
2、不应造成填料太大的溶胀和收缩。
3、控制pH和离子强度，可消除非排除机理的影响。
4、尽量降低溶剂粘度（加电介质）。
5、选择与样品折射率差别大的溶剂。
四、特点：
1、样品全部在溶剂的保留时间前洗脱。
2、色谱柱内的峰扩展较小。
3、.峰较窄，有利于检测。
4、.采用示差检测器。
五、不足：
1、峰容量小。
2、不能分离大小相似和分子量接近的样品。
六、应用：
适用于分子量不同的大分子样品（Mr＞2000）的分离。
   
   

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