高效液相色谱仪色谱柱固定相填料有硅胶、多孔聚合物和无机填料等。
一、硅胶特点：
大多数HPLC色谱柱使用硅胶微粒作载体。
1、机械强度高，使柱反压较低。
2、表面通过化学改性（修饰），可形成具有不同官能团的键合相。
3、更换溶剂时填料大小不会变化。
4、在高pH值时会溶解。
5、表面呈酸性。
6、纯度不高的酸性硅胶（A型硅胶）可分离中性和非电离的化合物。
7、高纯度弱酸性硅胶（B型硅胶）可分离对离子和可电离的化合物，尤其是碱性化合物分离较好。
二、多孔聚合物特点：
反相HPLC色谱柱的大多数聚合物微粒由苯乙烯和二乙烯基苯交联而成。
1、pH = 1～13均可用。
2、疏水保留性很强。
3、大孔的多孔聚合物对蛋白质样品的分离非常有用。
4、强保留的品可用0.1M的氢氧化钠从柱中洗脱。
5、柱效低。
6、在不同的有机改性剂中溶胀程度不同。
三、无机填料特点：
无机填料有石墨碳、氧化铝和氧化锆等。
1、石墨碳：
（1）保留强，用于分离在C18柱上保留较小的化合物。
（2）不会被流动相溶解，可用于任何pH值，适用温度范围宽。
（3）柱效低，极易碎裂。
2、氧化铝：
（1）刚性强，可制成稳定的柱床。
（2）未改性的氧化铝在正相条件下可分离弱极性化合物。
（3）可在pH值高达12的流动相中使用。
（4）不能用于羧酸样品的分离。
3、氧化锆：
（1）聚合物涂层的多孔氧化锆微粒柱可用于所有已知的HPLC洗脱剂。
（2）pH范围为1～14。
（3）可用于温度100℃。
