高效液相色谱仪键合相是将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相。目前,键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基质,用烷烃二甲基氯硅烷或烷氧基硅烷与硅胶表面的游离硅醇基反应形成Si-O-Si-C键型的单分子膜而制成。硅胶表面的硅醇基密度约为5个/nm2,由于空间位阻效应,不可能将较大的有机官能团键合到全部硅醇基上,及其它因素的影响,使得约有40%~50%的硅醇基未反应。
残余的硅醇基对键合相的性能影响很大,特别是对非极性键合相,可以减小键合相表面的疏水性,对极性溶质(特别是碱性化合物)会产生次级化学吸附,使溶质在两相之间的平衡速度减慢,降低键合相的稳定性,使碱性组分的峰形拖尾,从而使保留复杂化。为尽量减少残余醇基,一般在键合反应后用三甲基氯硅烷(TMCS)等进行钝化处理以提高键合相的稳定性,此钝化处理称为封端。另一方面,有些ODS填料是不封端的,以使其与水系流动相有更好的湿润性能。