高效液相色谱仪分析中的缓冲溶液是由磷酸、醋酸及其它弱酸等和它们的盐所构成的水溶液,流动相添加物主要指为了分离某些化合物而在流动相中添加的一些物质。
一、缓冲溶液:
在高效液相色谱分析过程中常使用缓冲溶液作为流动相,在流动相中添加少量的酸,以保持流动相pH值,提供一定的离子强度,通过控制酸性、碱性化合物的离解度或络合物的络合常数,达到调整保留时间和分离的目的,也有助于某些化合物峰形的改善。
一般是先确定盐的浓度,通过加入酸的办法调整合适的pH值。磷酸的pH值范围为3.7~5.6、5.8~8,醋酸的pH值范围为1.8~3.5。
选择介质和pH值除了考虑被分析样品外,还要考虑色谱系统所用的材料和固定相的承受能力。因为普通色谱系统使用的材料包括柱管、泵和检测器等主要是不锈钢,对不锈钢有侵蚀作用的酸不宜选用。如以硅胶为基体的固定相,pH值范围为2~7,高于或低于这个范围,由于固定相的不稳定会失去分离效能。
二、流动相添加物:
流动相添加物与被分析化合物通过共价键、氢键、偶极矩的相互作用形成各种形式的络合物和鳌合物等,改变其原有的化学性质,从而达到分离的目的。