高效毛细管电泳色谱仪压力进样要求毛细管内的填充介质具有流动性,当毛细管两端置于不同的压力环境中时,管内溶液流动,将样品引入。
一、进样动力:
进样动力有进样端加压(正压)、出口端抽真空(负压)和虹吸(重力)。
1、进样端加压:
采用压缩空气(钢瓶气)可实现正压进样,并可与毛细管清洗系统共用。多采用。
2、出口端抽真空:
负压进样要求控制设计特别精密,否则容易因泄露等原因出现不重复进样。
3、虹吸:
调节进样槽和出口槽之间的相对高度使之产生虹吸作用,将样品引入。
二、进样质量:
压力进样时,在时间t内,进入毛细管的样品质量Q为:
Q =(ΔP×πr4Ct)/(8ηL)
式中:r为毛细管内径,L为毛细管总长度,ΔP为管两端的压力差,C为样品浓度,η为管内溶液粘度。
电动进样的控制参数是管两端的压力差ΔP和进样时间t。其中ΔP通常为0~3450Pa;t通常为1~5s,有时可达60s或更大。
利用重力进行虹吸进样时,ΔP正比于毛细管进、出口液面的相对高度ΔH,进样量也可由ΔH控制。
ΔP = ρgΔH
式中:ρ为缓冲液密度;g为重力加速度;ΔH通常为5~20cm,多取10cm,对应的t多为5~10s。
ΔH大,进样快速,但毛细管上下移动幅度大,不利于有效控制,也不利于仪器的设计。
三、特点:
1、优点:
(1)进样量与组分的淌度无关,不存在电动进样中的歧视效应。进样量不受样品基质的影响,应用广泛。
(2)若严控样品粘度和温度,则进入毛细管的样品质量恒定。
2、缺点:
压力进样选择性差,样品和背景同时被引入毛细管内,对后续分离可能产生影响。