高效分配色谱仪填充柱是填充了固定相（载体和固定液）的色谱柱。
一、柱管选择：
1、柱管材质：
常用的填充柱有玻璃管柱、金属管柱和塑料管柱。
（1）玻璃管柱：
1）材质：硼硅玻璃。
2）特点：化学惰性好，柱效高，易碎。
3）使用事项：使用时等柱冷却后才能停止通载气。
4）应用：适用于强极性化合物的分离。
（2）金属管柱：
1）材质：主要为不锈钢。
2）特点：不易损坏，看不见柱内。
3）使用事项：使用前用布擦净内壁，再用10%热过氧化氢溶液浸泡，较后用水冲洗至中性。
4）应用：适用于脂肪酸酯和烃类化合物的分离。
（3）塑料管柱：
1）材质：多为聚四氟乙烯。
2）特点：化学惰性好，柱效不高。
3）使用事项：较高使用温度不超过260℃。
4）应用：适用于其它填充柱不好分离的样品分离，如HCl和Cl2等。
2、柱管尺寸：
柱管尺寸规格多，以适应不同样品分离目的、载体粒度、载气流量和仪器的要求。
分析柱外径有3.18mm、4.76mm和6.35mm；前两种内径为2mm，后一种内径为2mm、3mm和4mm；柱长多在3m以内；柱形有U形和螺旋形，U形柱柱效较高，螺旋柱的螺管直径比柱内径大15倍才可获得较好柱效。
柱内径越小，应填装粒度更小的固定相，才可获得更高的柱效。但柱容量随之减小，柱压降随之增大。
填充柱尺寸与载体粒度、载气流量的关系如下：
（1）柱内径2mm：
1）载体粒度：柱长＜3m时为100～120目，柱长＞3m时为80～100目。
2）载气流量：N2为8～15mL/min，H2为15～30mL/min。
（2）柱内径3mm：
1）载体粒度：柱长＜3m时为100～120目，柱长＞3m时为80～100目。
2）载气流量：N2为15～30L/min，H2为30～60mL/min。
（3）柱内径4mm：
1）载体粒度：柱长＜3m时为80～100目，柱长＞3m时为60～80目。
2）载气流量：N2为30～60L/min，H2为60～100mL/min。
二、固定相制备：
制备液体固定相时，将适量的固定液均匀地涂在载体表面上，使之能很好的分散，同时覆盖载体表面活性点。制备时溶解固定液的溶剂体积不宜过大，以能润湿载体为宜；溶剂沸点不宜过高，以免溶剂挥发时造成固定液损失；溶剂化学性质要稳定，不与固定液发生任何作用。
三、柱填充：
1、填充要求：
（1）固定相要均匀、紧密，减少空隙和死空间。
（2）填充时不得敲打过猛，以免造成载体破碎，致使柱性能变差。
2、柱填充方法：
（1）多采用抽空装柱，即将柱出口接上真空泵抽气，固定相从入口倾入，还可接CaCl2或硅胶干燥塔以防潮湿空气进人。
（2）沸点较低的固定相不宜采用抽空装柱，一般采用边装边敲打的手工法装柱。
（3）以聚四氟乙烯作载体的固定相，需将固定相冷冻12h，然后在0℃条件下填充到色谱柱中。色谱柱的湿气要预先用干燥气体置换，以免色谱柱结冰，固定相结块。
四、柱老化：
1、柱老化目的：
除去柱内剩余的溶液、固定液的低沸点馏分和易挥发的杂质，使固定液更均匀地分布在载体和管壁上。
2、柱老化方法：
柱老化多采用气体流动法，即将柱人口与进样室相接，出口不接检测器，通以载气，以2～4℃/min的速度程序升温至低于固定液较高使用温度20～30℃，老化12～24h。当基线平稳后，老化合格。
