反相键合相色谱仪C18柱的物理性质指标有硅胶纯度、柱尺寸、颗粒形状、粒径、表面积和孔径等。
一、硅胶纯度:
硅胶纯度指填料硅胶的纯度和残留金属离子的浓度。
A类硅胶由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属的含量高(硅羟基pKa低),导致碱性化合物发生拖尾。
B类硅胶(高纯)由于金属含量低,硅羟基pKa高,碱性化合物不发生拖尾。
二、柱尺寸:
柱尺寸指填料床的长度和内径。
短柱(15~100mm):分析时间短,柱压低。
长柱(150~250mm):分辨率高,分析时间长。
窄径柱(≤2.1mm):灵敏度高。
宽径柱(3~21.2mm):载样量大。
三、颗粒形状:
颗粒形状有球型和不规则型。
当使用粘度较大的流动相时,球型颗粒可降低柱压,延长色谱柱寿命。
四、粒径:
粒径指平均颗粒直径。通常为3~10μm。
较小颗粒,柱效较高,但柱压过高。
3.5μm颗粒常用于分离复杂的多组分样品,组分单一的样品多采用5μm颗粒。
五、表面积:
表面积指颗粒外表面和内部孔表面的总和。单位为m2/g。
表面积高的填料对多组分样品具有较强的保留能力、柱容量和分离度。表面积低的填料通常能迅速达到平衡,对梯度洗脱尤为重要。
六、孔径:
孔径指颗粒的孔或腔的平均尺寸。孔径范围为8~30nm。
大孔径填料可延长大分子溶质在填料表面的滞留时间,达到充分分离,改善峰形,适用于大分子分析。