高效色谱仪定量分析的标准加入法实质上是一种特殊的内标法,是在选择不到合适的内标物时,以被测组分的纯物质作为内标物加入到被测样品中,然后在相同的色谱条件下,测定加入被测组分的纯物质前后被测组分的峰面积或峰高,从而计算出样品中被测组分含量的方法。
一、具体做法:
首先,在一定的色谱条件下作出被测样品的色谱图,测定被测组分i的峰面积Ai或峰高hi,然后在样品中加入一定量被测组分i的纯物质(与样品相比,被测组分的浓度增量为△Ci%)。在完整相同的色谱条件下,作出已加入被测组分i的纯物质后的色谱图,测定这时被测组分i的峰面积 Ai′或峰高 hi′,然后计算出样品中被测组分的含量。
(Ci%+△Ci%)/ Ci% = A i′/Ai
Ci% = △Ci%/(Ai′/Ai-1)
同理:Ci% = △Ci%/(hi′/hi-1)
式中:Ci%为被测组分i的百分含量。
△Ci%为加入一定量被测组分i的纯物质后被测组分的百分含量增量。
Ai为被测组分i的峰面积。
Ai′为加入一定量被测组分i的纯物质后被测组分的峰面积。
hi为被测组分i的峰高。
hi′为加入一定量被测组分i的纯物质后被测组分的峰高。
二、优点:
1、不需要另外的标准物质作为内标物,只需被测组分的纯物质。
2、进样量不必十分有效,操作简单。
三、缺点:
要求加入被测组分前后两次色谱测定的色谱条件完整相同,以保证两次测定时的校正因子完整相等,否则将会引起分析测定的误差。