高效色谱仪分析的展开方法有洗脱法、顶替法和迎头法。
一、洗脱法：
1、工作原理：
组分与固定相之间的作用力＞流动相与固定相之间的作用力。
流动相在固定相上的吸附或溶解能力比样品组分中任何一个组分的吸附或溶解能力要弱得多。由于各组分在固定相上的吸附或溶解能力不同，被流动相冲洗出来的次序也不同，从而使各组分得到分离。
2、特点：
色谱柱所发挥的分离效能较高，色谱峰清晰，比较适合多组分混合物的分离，并容易从被分离组分中除去洗脱剂而获得纯度较高的物质。因此，洗脱法是较常用的展开方法。
二、顶替法：
1、工作原理：
组分与固定相之间的作用力＜流动相与固定相之间的作用力。
在流动相中加入对固定相的吸附或溶解能力比样品组分中任何一个组分的吸附或溶解能力要强的物质为顶替剂或直接用顶替剂作流动相，通过色谱柱，将各组分按吸附或溶解能力的强弱顺序，依次顶替出固定相。吸附或溶解能力较弱的组分较先流出，较强的较后流出。
2、特点：
适用于纯物质制备和浓缩分离某一组分。但是经一次使用后，色谱柱被样品或顶替剂饱和，必须更换色谱柱或除去被色谱柱吸附的物质后，才能再使用。
三、迎头法：
1、工作原理：
以样品本身作流动相，将样品连续通过色谱柱，在固定相上吸附或溶解能力较弱的组分，首先以纯物质状态流出，其次流出的是首先组分和次弱组分的混合物。依次类推。
2、特点：
在分离多组分混合物时，除首先组分外，其余均是非纯态，因此仅适用于从含有微量杂质的混合物中分离出一个高纯组分，而不适用于对混合物进行分离。
