高效毛细管电泳仪是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,影响电泳迁移率的因素有内在因素和外界因素。
一、影响电泳迁移率的内在因素:
1、溶质所带净电荷的量:
溶质所带净电荷的量越大,迁移率越大。
2、溶质大小和形状:
对于球形离子:μep = vep/E = q/(6πηr)
对于棒状离子:μep = vep/E = q/(4πηr)
二、影响电泳迁移率的外界因素:
1、电场强度:
电渗速度和电场强度成正比。
2、毛细管材质:
酸度影响毛细管表面Si-OH基的电离。特别是在pH = 4~7范围内,影响更显著,此时溶液pH值与电渗速度成近线性关系。
3、载体粘性:
阻碍泳动并有吸附作用。
4、溶液pH值:
溶液pH值决定带电颗粒的解离程度,也决定颗粒所带净电荷的多少。
5、缓冲液离子强度:
缓冲液中的离子增加会使迁移率降低,原因是带电离子会吸引相反符号的离子聚集在其周围,形成一个与该离子符号相反的离子氛,使该离子向相反的方向运动,从而降低该离子的迁移率。
缓冲液离子强度,影响双电层的厚度、溶液粘度和工作电流,明显影响电渗速度大小。
6、添加剂:
(1)加入浓度较大的中性盐如K2SO4,溶液离子强度增大,电渗速度减小。
(2)加入表面活性剂,可改变电渗速度的大小和方向。
(3)加入有机溶剂如甲醇和乙腈,使溶液粘度减小,电渗速度增大。
7、温度:
毛细管内温度升高,使溶液粘度下降,电渗速度增大。