影响高效毛细管电泳仪分离效果的因素有电场强度、缓冲液pH、离子强度、温度和添加剂等。
一、电场强度:
1、结果:
电渗速度与电场强度成正比。
2、说明:
(1)电场强度降低,分离效率和分辨率降低。
(2)电场强度增大,焦耳热增大。
二、缓冲液pH:
1、结果:
pH增大,电渗速度增大。
2、说明:
(1)改变电渗速度较方便有用的方法。
(2)可能会引起组分电荷和结构改变。
三、离子强度(缓冲液浓度):
1、结果:
离子强度增大,Zeta电位降低,电渗速度降低。
2、说明:
(1)离子强度增大,电流和焦耳热增大。
(2)离子强度低,可能存在样品吸附问题。
(3)导电性与样品不同,可能引起峰形畸变。
(4)离子强度低,样品装载量小。
四、温度:
1、结果:
温度每改变1℃,溶液粘度变化约2%~3%。
2、说明:
温度由仪器自动控制,常用方法。
五、添加剂:
1、结果:
(1)加入浓度较大的中性盐如K2SO4,离子强度增大,电渗速度降低。
(2)加入表面活性剂,可改变电渗速度的大小和方向。某些阳离子表面活性剂使电渗速度降低,某些阴离子表面活性剂如十二烷基硫酸钠(SDS),可使壁表面负电荷增加,电渗速度增大。
(3)加入有机溶剂如甲醇和乙腈,使溶液粘度减小,电渗速度增大。
2、说明:
变化复杂,其影响应通过实验测定,可能改变选择性。