高效液相色谱仪化学键合固定相是采用硅胶表面键合技术对硅胶微粒表面进行修饰(硅烷化),使硅胶表面带有不同的功能团而形成的固定相。目前在色谱填料中,键合相占78%左右(其中C18占反相色谱的72%),硅胶占10%左右。
一、硅酸酯型键合相(≡Si-O-C):
较先用于液相色谱的健合相。
醇与硅羟基进行酯化反应制得。
键合相的有机表面是一些单体,具有良好的传质特性。但这些酯化过的硅胶易水解且受热不稳定,因此仅适用于不含水或醇的流动相。
以弱极性溶剂洗脱,分离极性化合物。
二、硅氮型键合相(≡Si-N):
先用酰氯将硅羟基氯化,再与氨基化合物反应制得。
可用非极性和强极性溶剂作流动相。
三、硅碳型键合相(≡Si-C):
将硅胶表面氯化后,使Si-Cl键转化为Si-C键,将有机基团直接键合在硅胶表面上。此反应不方便。
当使用水溶液时,必须限制pH = 4~8范围内。
四、硅氧烷型键合相(≡Si-O-Si-C):
目前应用较广泛的键合相。
硅羟基与有机氯硅烷或烷氧基硅烷反应制得。
具有相当的耐热性和化学稳定性,在pH = 2~8.5范围内对水稳定,有机分子与载体间结合牢固,固定相不易流失。
例十八烷基硅烷键合相(ODS或C18)是较常用的非极性键合相,用于反相色谱,在70℃以下和pH = 2~8范围内可正常工作。