高效液相色谱仪固定相有液固吸附色谱固定相、液液分配色谱固定相、离子交换色谱键合固定相和凝胶色谱固定相等类型。
一、液固吸附色谱固定相:
1、硅胶:
为刚性固体。
(1)表面多孔硅胶:
在30~40μm的玻璃微球表面附着一层厚度为1~2μm的多孔硅胶而成。
易装柱,柱效不高,柱容量小。
(2)全多孔硅胶:
1)无定形全多孔硅胶:柱效高,柱容量大,价廉。但要匀浆装柱。
2)球形全多孔硅胶:柱效高,柱容量大,涡流扩散小,渗透性好,价廉。
(3)全多孔微粒硅胶:传质阻抗小,柱容量大。
2、分子筛:
为强极性。
3、高分子多孔微球:
(1)非极性高分子多孔微球:
由苯乙烯和二乙烯苯交联而成。
柱选择性好,峰形好,柱效低。
适合分离弱极性化合物。
(2)极性高分子多孔微球:
在苯乙烯和二乙烯苯交联而成的聚合物中引入极性官能团而成。
4、氧化铝:
为弱极性。
5、活性炭:
为非极性。
二、液液分配色谱固定相:
固定相由载体和固定液组成。
1、械涂渍固定液:
载体有硅胶、氧化铝和硅藻土等。硅胶有表面多孔硅胶、无定形全多孔硅胶、球形全多孔硅胶和全多孔微粒硅胶。
目前械涂渍固定液已逐渐被键合固定相取代。
2、键合固定相:
载体有200~300m2/g的硅胶和聚合物(如聚苯乙烯和聚乙烯醇胶等)。
目前载体几乎都是硅胶,有表面多孔硅胶、无定形全多孔硅胶、球形全多孔硅胶和全多孔微粒硅胶。
(1)非极性键合固定相:
键合非极性基团,常用十八烷基硅烷键合固定相(ODS)。
用于反相色谱。
(2)弱极性键合固定相:
常用醚基和二羟基等键合固定相。
用于反相或正相色谱。
(3)极性键合固定相:
键合极性基团,常用氨基和氰基等键合固定相。
用于正相色谱。
三、离子交换色谱键合固定相:
将离子交换基团键合到硅胶基质表面上形成的固定相。
载体有硅胶、合成树脂和纤维素等,多为全多孔微粒硅胶。离子交换基团有-SO3H(强酸型)和-NR3Cl(强碱型)等。
四、凝胶色谱固定相:
凝胶是一种经过交联而具有立体网状结构的多聚体,含有大量液体(一般为水),柔软而富于弹性。
有软性凝胶、半刚性凝胶和刚性凝胶。