尺寸排阻色谱仪分析中使用的柱填料(固定相)一般为凝胶,除了要求热稳定性、机械强度和化学情性外,还应考虑排阻极限、分离范围、固定相流动相比和柱效,这些都与凝胶的孔径大小分布有关。
某些高交联聚苯乙烯胶、聚合胶、硅胶和多孔玻璃微球可以在高达50atm下使用。这些填料比起软胶来说具有某些优点:填充比较容易,不需要放在洗脱液中作预先溶胀,且能获得机械性能稳定的柱子(即渗透率与外加压力无关)。因为填料不需要进行充分溶胀,可以使用多种洗脱液。又因溶胀度不变,能够方便地更换洗脱液。这些填料和其孔结构适用于所有有机溶剂,甚至在高温下也是如此,在表征聚烯烃的特性时,这一点是非常重要的。
硅胶的孔径可以做到2~2500nm。平径孔径为6nm的硅胶可以分离分子量小于1000的物质,平径孔径为25nm的硅胶可以分离分子量为2000~100000的聚苯乙烯样品。当硅胶的平径孔径为400nm时,即使是分子量为7×106的高聚物标样也不能被全部排阻。
这些填料缺点是它们的吸附特性。在很多情况下,通过选择适当地洗脱液可以限制其活性。