高效液相色谱仪固定相类型有多种。
一、液液分配色谱仪固定相:
1、全多孔型载体:
全多孔型载体是由氧化硅、氧化铝和硅藻土等制成的多孔球体。早期采用100um的大颗粒,表面涂渍固定液,性能不佳已不多见。现采用10um以下的小颗粒。
2、表面多孔型载体(薄壳型载体):
表面多孔型载体是20世纪60年代中期出现的载体。在30~40um的玻璃微球表面附着一层厚度为1~2um的多孔硅胶,形成多个向外开放的孔隙,表面积小,柱容量低。现在只用于预净化柱、预浓缩柱上,或作某些简单的混合物分离。
3、化学键合固定相:
化学键合固定相是利用化学反应将有机分子键合到载体表面上,形成均一、牢固的单分子液膜,是当今高效液相色谱仪较常用的固定相,大约占高效液相色谱仪固定相的四分之三。
(1)固定相不易流失,柱的稳定性和寿命较高。
(2)能耐受各种溶剂,可用于梯度洗脱。
(3)表面较为均一,没有液坑,传质快,柱效高。
(4)能键合不同基团以改变其选择性。
二、液固吸附色谱仪固定相:
1、按极性可分:
(1)极性固定相:硅胶、氧化镁和分子筛等。
(2)非极性固定相:高聚物微球、石墨化碳黑和聚合物包裹固定相等。
2、按结构可分:
(1)全多孔型固定相。
(2)表面多孔型固定相(薄壳型固定相)。
三、离子交换色谱仪固定相:
1、按结构可分:
(1)表面多孔型离子交换树脂。
(2)离子交换键合固定相。
2、按树脂类别可分:
(1)阳离子交换树脂。
(2)阴离子交换树脂。
四、凝胶色谱仪固定相:
1、软质凝胶:
有葡聚糖凝胶和琼脂凝胶等。
多孔网状结构,水为流动相。
适用于常压排阻分离。
2、半硬质凝胶:
是苯乙烯-二乙烯基苯交联共聚物。
非极性有机溶剂为流动相,不能用丙酮和乙醇等极性溶剂。
3、硬质凝胶:
有多孔硅胶和多孔玻璃微球等。
化学稳定性好,热稳定性好,机械强度大,流动相性质影响小,可在较高流速下使用。
可控孔径玻璃微球具有恒定孔径和窄粒度分布。