紫外吸收检测器是高效液相色谱仪中使用较广泛的检测器。
一、工作原理:
紫外吸收检测器是基于朗伯-比耳定律,根据被测组分对紫外光或可见光具有吸收,且吸收强度与组分浓度成正比的关系进行检测。
二、结构:
由光源、分光系统、样品池和检测系统等组成。
三、类型:
1、固定波长紫外吸收检测器:
由低压汞灯提供固定波长254nm(或280nm)的紫外光经入射石英棱镜准直,再经遮光板分为一对平行光束分别进入流通池的测量臂和参比臂。经流通池吸收后的出射光,经过遮光板、出射石英棱镜和紫外滤光片,只让254nm的紫外光被双光电池接收,光强度经对数放大器转化成吸光度后输送至记录仪。
为减少死体积,流通池的体积很小,仅为5~l0uL,光路约5~10mm,常采用H形结构。
2、可变波长紫外吸收检测器:
光源波长选择可任意可调,应用非常广泛。
(1)可选择组分的较大吸收波长作为检测波长,提高检测灵敏度。
(2)可选择组分有强吸收而干扰无吸收的波长进行检测,提高分析的选择性。
(3)梯度洗脱时,可选择流动相改变而其吸光度不变的波长进行检测,有利于梯度洗脱。
(4)可选择的波长范围很大,既提高检测器的选择性,又可选用组分的较灵敏吸收波长进行检测,提高检测灵敏度。
(5)具有有停流扫描功能,可绘出组分的光吸收谱图,以进行吸收波长的选择。
3、光电二极管阵列检测器:
属于多波长快速扫描紫外吸收检测器,是高效液相色谱仪较有发展前途的检测器。
四、特点:
1、应用广泛。
2、灵敏度高。
3、线性范围宽。
4、对流动相的温度和流速变化不敏感。
5、适于梯度洗脱。
五、不足:
1、只能用于检测能吸收紫外光的组分。
2、溶剂要选用无紫外光吸收的物质。
3、紫外光不透过的溶剂不能检测(如苯等)。
六、应用:
对大部分有机物有响应。