气相色谱仪具有高效能、高选择性、高灵敏度和分析速度快等特点,但仅适合分析蒸气压低和沸点低的样品,在有机物中仅有20%的样品适合于气相色谱仪分析。高效液相色谱仪弥补了气相色谱仪的不足,适合分析80%的有机物。高效液相色谱仪与气相色谱仪的差别如下:
一、分离机理:
1、高效液相色谱仪依据吸附、分配、筛析、离子交换与亲和等多种原理进行分离,可选用的固定相种类多。
2、气相色谱仪依据吸附和分配原理进行分离,可选用的固定相种类较多。
二、进样方式:
1、高效液相色谱仪的样品需制成溶液。
2、气相色谱仪的样品需加热气化或裂解。
三、流动相:
1、高效液相色谱仪:
(1)液体流动相可为离子型、极性、弱极性和非极性溶液,可与被分析样品发生相互作用,并能改善分离的选择性。
(2)液体流动相动力粘度大,流动相传输压力高。
2、气相色谱仪:
(1)气体流动相为惰性气体,不与被分析样品发生相互作用。
(2)气体流动相动力粘度小,流动相传输压力低。
四、色谱柱:
1、高效液相色谱仪的固定相粒度为5~10um;填充柱内径为3~6mm,柱长为10~25cm,柱效为103~104块理论塔板/m;毛细管柱内径为0.01~0.03mm,柱长为5~10m,柱效为104~105块理论塔板/m;柱温为常温。
2、气相色谱仪的固定相粒度为0.1~0.5mm;填充柱内径为1~4mm,柱长为1~4m,柱效为102~104块理论塔板/m;毛细管柱内径为0.1~0.3mm,柱长为10~100m,柱效为103~104块理论塔板/m;柱温为常温~300℃。
五、检测器:
1、高效液相色谱仪:
(1)通用型检测器:ELSD和RID。
(2)选择型检测器:UVD、PDAD、FD和ECD。
2、气相色谱仪:
(1)通用型检测器:TCD和FID。
(2)选择型检测器:ECD、FPD和NPD。
六、柱外效应:
1、高效液相色谱仪的溶质在液相中的扩散系数很小,色谱柱以外的死空间应尽量小,以减少柱外效应对分离效果的影响。
2、气相色谱仪的溶质在气相中的扩散系数大,柱外效应影响较小,应尽量减小柱外效应对分离效果的影响。
七、应用:
1、高效液相色谱仪可分析低沸点和低分子量有机物、高沸点和高分子量有机物、无机离子化合物、热不稳定化合物和生物活性物质等。
2、气相色谱仪可分析低沸点和低分子量有机物及有效气体,配合程序升温可分析高沸点有机物,配合裂解技术可分析高聚物等。