高效液相色谱仪自1967年问世以来,由于使用了高压输液泵、全多孔微粒填充柱和高灵敏度检测器,实现了对样品的高速、高效和高灵敏度的分离测定。20世纪70~80年代高效液相色谱仪获得快速发展,并引入微机处理技术,极大地提高了自动化水平和分析精度。
高效液相色谱仪可分为分析型和制备型,虽然它们的性能各异,应用范围不同,但其基本组件相似,都由输液系统、进样系统、分离系统、检测系统和数据处理系统等组成。现在用计算机控制的高效液相色谱仪,自动化程度高,既能控制仪器的操作参数,如溶剂梯度洗脱、流动相流量、校温、自动进样、洗脱液收集和检测器功能等,又能对获得的色谱图进行收缩、放大和叠加,以及对保留数据、峰高和峰面积进行处理等。
高效液相色谱工作过程为:高压输液泵将贮液器中的流动相经过进样器带入色谱柱,当注入欲分离的样品时,流动相将样品一并带入色谱柱进行分离,然后依先后顺序进入检测器,记录仪将检测器输出的信号记录下来,即得到色谱图,流动相和样品从色谱仪出口流出被馏分收集器收集。