高效液相色谱仪分析中进样上柱的样品必须是可重现的均质溶液，样品前处理是为了尽可能除去对分析有干扰的杂质，保证重现性好，不损害色谱柱，能与HPLC色谱条件相兼容。

一、溶剂：

溶解样品的溶剂应能溶于流动相而不影响样品的保留值和分离度，较好使用流动相溶解样品或使用比初始比例流动相洗脱能力更弱的溶剂溶解样品。当样品所用溶剂与流动相不一致时，应避免样品进入柱中时因溶解度降低而导致沉淀。

未溶解的或含颗粒物的样品溶液会造成堵塞，进样前一定要使用合适的滤膜过滤。

二、进样量：

在分析型色谱中，加到色谱柱上的样品量一般是μg级，也可以更少。如果样品溶液浓度过大，可通过稀释降低溶液中被测物的浓度，以避免色谱柱超载或检测器超限。进样体积应尽量小，避免由于体积过载对分离造成不良影响。

为适应检测灵敏度的需要，某些痕量分析需要将样品浓缩和富集。

三、样品纯度：

可根据样品性质和分离目的使用固相萃取和溶剂萃取等样品前处理手段，较大程度的除去干扰物，达到纯化和富集目标化合物的目的，同时延长色谱柱使用寿命。

组分非常复杂的样品往往需要预分离为简单的片段，避免色谱峰过分重叠。